Sigma-Aldrich MMP-3, Proenzyme, Human, Recombinant

产品概述

从细胞培养上清中纯化的重组人MMP-3原。可用作阳性对照或酶谱分析或底物测定的标准品。使用前需要活化以进行免疫印迹。分子量57000/58000。基质金属蛋白酶（MMP）是一个酶家族，负责降解细胞外基质成分，如胶原、层粘连蛋白和蛋白聚糖。除了序列同源性外，所有MMPs都具有以下特征：催化机理取决于活性中心的锌离子，它们裂解一种或多种细胞外基质成分，它们作为酶原分泌，通过从N末端去除大约10 kDa的片段而被激活，并且它们被组织抑制剂抑制，基质金属蛋白酶-3（MMP-3），也称为基质溶解素-1和transin（EC 3.4.24.17），切割许多底物，包括软骨蛋白聚糖，II、III、IV、V和IX型胶原，基质金属蛋白酶-3（MMP-3）以~57 kDa和~59 kDa的酶原形式分泌，可被有机汞药物体外激活（例如，4-氨基苯基乙酸汞、APMA），在体内通过蛋白酶经中间体形式转化为45 kDa的活性MMP-3酶，并可进一步自溶为28 kDa的形式。3被认为在与诸如类风湿性关节炎和癌细胞侵袭的病症相关的病理生理学降解过程中起重要作用.

应用领域

免疫印迹法（见备注）底物裂解试验（见备注）酶谱法（见备注）

物理形态

从100 mM NaCl、50 mM HEPES（pH 7.3）中冻干。

制备/使用说明

复溶后，分装至硅化小瓶中并冷冻（-70 ℃）。

分析说明

MMP-3酶原的活性通过以0.5mM硫肽内酯（Ac-Pro-Leu-Gly-S-Leu-Leu-Gly-Oet）为底物的底物切断法测定，另外，通过HPLC测定活化的MMP-3对肽底物（DNP-PYAYWMR）的分解来评价。

其他说明

MMP-3酶原可用作免疫印迹、酶谱分析或底物裂解试验的阳性对照或标准品。SDS-PAGE和免疫印迹使用0.5 μg/泳道。酪蛋白酶谱使用1μg/泳道的MMM-3酶原或活化的MMP-3。MMP-3酶原可通过在50 mM Tris（pH 7.5）中孵育在体外活化。在含有0.05% Triton-X-100、5 mM CaCl 2和1 mM 4-氨基苯基乙酸汞（APMA）的溶液中于37°C孵育2-4小时。为了溶解APMA，在0.05 M NaOH中制备10 mM储备溶液。在37° C下使用1 mM APMA孵育4小时后，约90%的酶原MMP-3被激活。

技术规格