Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human CysLT 1 Cysteinyl Leukotriene Receptor

产品概述

全长人CYSLTR 1 cDNA

半胱氨酰白三烯（C4、D4、E4）是由谷胱甘肽（Cys-Gly或Cys）修饰的花生四烯酸衍生物，激活肥大细胞后可释放半胱氨酰白三烯，引起平滑肌收缩、气道收缩和血管通透性增加，其生物学效应由两个GPCR介导，CysLT 1和CysLT 2。CysLT 1选择性拮抗剂孟鲁司特在临床上用于治疗哮喘（Brink等人，2003年;埃文斯，Chemicon的CysLT 1膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，GPCR表面表达水平;结果表明，该膜对（3 3 H）-白三烯D4（LTD 4）的Kd值为0.97nM，在10.0 μ g/孔CysLT 1膜和1.5nM（3 3 H）-白三烯D4的条件下，LTD 4与CysLT 1相互作用的抑制剂的亲和力为0.97nM，与CysLT 1相互作用的抑制剂的亲和力为0.97nM，与（3 3 H）-白三烯D4相互作用的抑制剂的亲和力为0.97nM。获得大于3倍的信号背景比。

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人CysLT1 GPCR膜制备。

放射性配体结合试验和GTP γ S结合

生化/生理作用

GPCR分类：A蛋白靶标：CysLT1靶标亚族：白三烯

产品特点

将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1 - 2小时。（Millipore目录号MAHF C1H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM Tris，pH 7.4洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mM Tris，pH7.4，20 mM CaCl 2，25 mM MgCl 2，10 mM甘氨酸，10 mM L-半胱氨酸，过滤并储存在4 ℃。（Perkin Elmer #：NET-101）洗涤缓冲液：50 mM Tris，pH 7.4，过滤并在4 ℃下储存。

物理形态

一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于3倍信号的膜的量：背景，具有1.5nM的3H-标记的LTD4。包装缓冲液中的液体：50mM

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

技术规格