Sigma-Aldrich Raf-1 RBD Protein, GST, 300 µg

产品概述

研究领域：细胞信号传导快速加速型纤维肉瘤（Raf）家族由三种高度保守的胞浆丝氨酸/苏氨酸激酶（ARAF、BRAF和RAF 1或CRAF）组成，其特征在于三个保守区域，如CR 1、CR2和CR 34。RAS结合结构域（RBD）和富含半胱氨酸结构域（CRD）存在于N-末端CR 1区域。PMID 33608534

应用领域

研究类别代谢

研究亚类肥胖代谢性疾病

特异性结合并沉淀细胞裂解物中的Ras-GTP。在沉淀Ras-GTP之前，可结合谷胱甘肽包被的平板。

生化/生理作用

c-Raf-1作为Ras的效应子，是一种丝氨酸-苏氨酸激酶，其将传入信号传递到丝裂原活化蛋白激酶途径。该途径与多种细胞反应相关，包括细胞增殖、存活和分化。RBD在体外直接与Ras提升GTP复合物结合。此外，细菌表达的重组RBD在体外呈现稳定的折叠构象。GST提升RBD融合蛋白，连接到琼脂糖凝胶珠上，可用于沉淀与GTP组成型结合的致癌Leu 61-Ha-Ras。

物理形态

300 μg Raf-1 RBD、GST溶于150 μL PBS（pH 7.4）、0.5 mM PMSF和20%甘油中。

谷胱甘肽琼脂糖

制备/使用说明

自装运之日起-20 ° C下储存1年。

分析说明

活性Ras的亲和沉淀：Raf-1-RBD，GST可以在谷胱甘肽包被的平板上捕获，并用于从HeLa细胞裂解物中捕获GTP活化的Ras。每孔使用2 μg Raf-1-RBD，GST捕获25-100 μg EGF刺激的HeLa细胞裂解物。Upstate还提供Ras GTdR ELISA试剂盒（17-424）。注：由于Ras的自发失活，使用在-70 ° C下储存少于6个月的裂解物。

技术规格