Sigma-Aldrich ChemiScreen Recombinant Human BB1 Bombesin/Neuromedin B Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人BB 1 GPCR膜制备。

产品概述

蛙皮素（Bombesin）是一种最早在两栖动物皮肤中发现的生物活性肽，它与两种哺乳动物肽--胃泌素释放肽（GRP）和神经介肽B（NMB）相关，由3个GPCR家族组成，包括NMB-R（BB 1）、GRP-R（BB 2）和BRS-3（BB 3），介导这两种肽的生物学效应。BB 2与GRP结合的亲和力是与NMB结合的亲和力的50-300倍，而BB 1与NMB结合的亲和力是与GRP结合的亲和力的10-800倍（Tokita等，2004）.配体与BB 1的结合激活Gq以增加细胞内钙浓度. CNS是NMB和BB 1表达的主要位点，BB 1似乎与体温调节有关Chemicon的BB 1膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，本发明提供了一种方法，它们是用于筛选BB 1与神经介肽B相互作用的拮抗剂的理想HTS工具。膜制备物对（125 I）-蛙皮素表现出0.35-0.43 nM的Kd。孔BB 1 Membrane Prep和0.3 nM（125 I）-蛙皮素，获得大于40倍的信号背景比。

编码BB 1的全长人NMBR cDNA

应用领域

放射性配体结合测定和GTPγS结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：BB 1

目标亚家族：铃蟾肽

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并储存于4°C放射性配体：（125 μ l）蛙皮素（Perkin Elmer#NEX258）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并在4 ℃下储存。

包装信息

每瓶1 mL

物理形态

一个包装包含足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于40倍信号的膜的量：0.3 nM的125 I标记蛙皮素的背景。包装缓冲液中的液体：50 mM Tris pH 7.4，10%甘油和1% BSA，不含防腐剂。将膜蛋白在包装缓冲液中调节至指定浓度，快速冷冻，并储存在-80 ° C下。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

信号：使用不同量的BB 1膜制备物在竞争性结合试验中获得的背景和特异性结合值：10 µg/孔5 µg/孔信号：背景82.5 74.8特异性结合（cpm）27377 22443质量标准：1单位= 5 µg膜制备物Bmax：3.1 pmol/mg Kd：0.39 nM

技术规格