Sigma-Aldrich ChemiScreen BB2 Bombesin Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人BB 2 GPCR膜制备。

产品概述

蛙皮素（Bombesin）是最早在两栖动物皮肤中发现的一种生物活性肽，与哺乳动物的两种肽--胃泌素释放肽（GRP）和神经介肽B相关，是一个由3种GPCR组成的家族，包括NMB-R（BB 1）、GRP-R（BB 2）和BRS-3（BB 3），介导肽的生物学效应。受体对肽的亲和力不同。配体与BB 2的结合激活Gq，增加细胞内钙浓度。GRP刺激内分泌细胞释放胃泌素，刺激胃肠道平滑肌活动。此外，GRP与BB 2的结合刺激多种细胞类型的增殖，并与小细胞肺癌和其他恶性肿瘤的进展有关。CNS也是GRP表达的主要部位，GRP和BB 2与生物钟、条件性恐惧和食物摄入有关Chemicon的BB 2膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;结果表明，该膜对（125 I）-Tyr 4-蛙皮素的Kd值为0.114 nM，对（125 I）-Tyr 4-蛙皮素的Kd值为0.3 nM，5 μg/孔或10 μg/孔BB 2 Membrane Prep通常产生大于20倍的信号背景比。

编码BB 2的全长人GRPR cDNA

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人BB 2 GPCR膜制备。

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：BB 2

目标亚家族：铃蟾肽

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合（检测浓度见图1和图2），孵育1-2小时。过滤前，用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Tris，pH 7.4，10 mM MgCl 2，1 mM EDTA，过滤并储存在4 ℃放射性配体：（125 I）-Tyr 4-蛙皮素（Perkin Elmer#：NEX-258）洗涤缓冲液：50 mM Tris，pH 7.4，过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜的量：0.3 nM的125 I标记蛙皮素的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至0.5mg/ml，快速冷冻，并储存在-80 ℃。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

信号：在竞争结合测定中使用不同量的BB 2膜制备物获得的背景和特异性结合值：10 μg/孔5 μg/孔信号：背景24 23特异性结合（cpm）19，260 12，610规格：Bmax：1.28 pmol/mg; Kd：0.114 nM

技术规格