Sigma-Aldrich ChemiSCREEN CB1 Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人CB 1 GPCR膜制备。

产品概述

CB 1是一种GPCR，主要在脑和神经组织中表达，并介导许多CNS反应，如镇痛、食欲、认知、记忆和运动活性。许多大麻素配体与CB 1结合并激活Gi/o介导的下游反应，包括抑制cAMP产生和激活离子通道和MAP激酶。CB 1的配体包括外源性激动剂，如Delta 9-THC，CB 1是植物大麻的主要精神活性成分，内源性类花生酸激动剂如大麻素，已开发出许多CB 1的合成激动剂如CP 55940和R-（+）-WIN 55212，以及拮抗剂如SR 141716 A（Howlett等，2002）。CB 1激动剂在镇痛和止吐特性方面具有临床效用，Chemicon的CB 1膜制剂是由我们专有的稳定重组蛋白制成的粗膜制剂，它是由一种新的抗肿瘤药物制成的，而CB 1拮抗剂是治疗肥胖症的理想药物细胞系，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，它们是筛选CB 1激动剂和拮抗剂的理想HTS工具。膜制备物对（3 H）-SR 141716 A的Kd为7 nM。在2 nM（3 H）-SR 141716 A与CP 55940作为未标记竞争剂存在下，5 μg/孔和10 μg/孔CB 1 Membrane Prep分别产生4倍和5倍的信号背景比。

人CB 1

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人CB 1 GPCR膜制备。

放射性配体结合测定和GTPγS结合。

生化/生理作用

蛋白质靶标：CB 1

目标子系列：大麻素

GPCR Class：A

产品特点

建议的试验条件：将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次（每次洗涤每孔1 mL），将平板干燥并计数。50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2%BSA，过滤并储存在4 ℃。然后加入到膜中，使最终DMSO浓度为15%。放射性配体：（3 H）SR 141716 A（阿默舍姆#TRK 1028）清洗缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个小瓶含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是产生约4倍信号的膜量：2 nM（3 H）SR 141716 A背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至0.5mg/ml，快速冷冻，并储存在-80 ℃。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

质量标准：1单位= 10 μg Bmax：15 pmol/mg Kd：7 nM（SR 141716 A）

技术规格