Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human CXCR1 Chemokine Receptor，用于放射性配体结合测定和GTP γ S结合的人CXCR 1/ IL-8a GPCR膜制备。

产品概述

：全长人CXCR 1 cDNA

CXCR1（也称为IL-8 RA）是在中性粒细胞、CD 8（+）T细胞和肠上皮细胞上表达的Gi/o偶联GPCR，（Murphy，1997年; Sturm等人，2005年; Takata等，2004）XCR 1特异性结合趋化因子白细胞介素-8（IL-8），而相关受体CXCR 2，CXCR 1与IL-8和其他几种趋化因子混杂结合，被认为是脓毒症中性粒细胞对IL-8应答的主要调节因子（Cummings等，1999）。已经开发了CXCR 1和CXCR 2的拮抗剂，并在再灌注损伤的动物模型中显示出功效（Bertini等，2004; Kaneider等，2005）Millipore的CXCR 1膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，在本发明中，它们是筛选CXCR 1与IL-8相互作用拮抗剂的理想HTS工具。8.使用5 μg/孔CXCR 1 Membrane Prep和0.1 nM（125 I）-IL-8，获得大于5倍的信号背景比。

应用领域

放射性配体结合测定和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

Protein Target：CXCR1 / IL-8a

目标亚家族：趋化因子

产品特点

激发条件推荐的试验条件：将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES，pH 7.4，0.5%BSA洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并在4 ℃下储存（Perkin Elmer #NEX277）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个小瓶含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于5倍信号的膜的量：0.1 nM的125 I标记的IL-8的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在包装缓冲液中调节至指定浓度，快速冷冻，并储存在-80 ° C。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

表1.信号：在竞争结合测定中获得的不同量的CXCR 1受体膜制备物的剂量响应曲线中的信号和特异性结合值，其中未标记的IL-8. 5 μg/孔10 μg/孔信号：背景14. 8 12. 8特异性结合（cpm）8965 9624规格：1单位= 5 μg Bmax：3. 7 pmol/mg; Kd：0. 2 nM

技术规格