Sigma-Aldrich ChemiScreen D1 Dopamine Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合分析和GTP γ S结合的人D1 GPCR膜制备。

产品概述

Dopamine exerts its action by binding to five distinct dopamine receptors, all of which belong to G protein-coupled receptor family (Missale et al. 1998). The D₁ subtype is the most abundant dopamine receptor in the central nervous system. Activation of D₁ receptor stimulates adenylyl cyclase, activates cyclic AMP-dependent protein kinases. It regulates neuronal growth and development, mediate some behavioral responses and modulate dopamine receptor D₂-mediated events. Chemicon′s D₁ membrane preparations are crude membrane preparations made from our proprietary stable recombinant cell lines to ensure high-level of GPCR surface expression; thus, they are ideal HTS tools for screening of antagonists of H₁ interactions and its ligands. The membrane preparations exhibit a Kd of 1.5 nM for [^{3H]-SCH 23390. With 1.5 nM [3H]- SCH 23390, 2.5 µ}g/well and 10 µg/well D₁ Membrane Prep typically yield greater than 5 and 15-fold signal-to-background ratios, respectively.

全长人DRD 1 cDNA

应用领域

放射性配体结合测定和GTP结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：D1

目标子家族：多巴胺

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合（检测浓度见图1和图2），孵育1-2小时。过滤前，用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Tris，pH 7.4，10 mM MgCl 2，1 mM EDTA，过滤并在4 ℃下储存（Perkin Elmer#：NET-930）清洗缓冲液：50 mM Tris，pH 7.4，过滤并在4 ℃下储存。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜量：1.5 nM 3 H标记SCH 23390的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至0.5mg/ml，快速冷冻，并储存在-80 ℃。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

Bmax：11.85 pmol/mg; Kd：1.5 nM

技术规格