Sigma-Aldrich ChemiScreen D5 Dopamine Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人D5 GPCR膜制备。

产品概述

多巴胺（Dopamine）是一种儿茶酚胺类神经递质，在中枢神经系统中控制运动、认知、情绪和神经内分泌过程，在外周神经系统中调节心血管、肾脏和胃肠道过程，其生物学活性由一个由5个GPCR组成的家族介导，D1和D5亚型与Gs偶联，增加细胞内cAMP，而D2、D3、D4、D5、D 6、D 7、D8、D9、D10、D11、D12、D13、D14、D15、D16、D17、D18、D19、D1 D3和D4亚型与Gi偶联以减少cAMP（Missale等，1998）.具有D5靶向缺失的小鼠的高血压表型表明D5调节交感神经血管张力的中枢控制（Hollon等，2002）。此外，D5调节运动和皮质纹状体长期抑制（Centonze等，2003）. Chemicon的克隆的表达人D5的细胞系在Chem-1宿主中制备，其支持在细胞表面高水平的重组D5表达，并含有高水平的混杂G蛋白Gα15，因此，该细胞系是筛选D5及其配体之间相互作用拮抗剂的理想工具。膜制备物对（3 H）-SCH 23390的Kd为2.25 nM。使用0.5 nM（3 H）-SCH 23390，10 µg/孔D5 Membrane Prep产生的信号背景比大于3倍。

编码D5的全长人DRD 5 cDNA

生化/生理作用

蛋白质靶标：D5

产品特点

将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2%BSA，过滤并在4 ℃下储存。（3 H）-SCH 23390（Perkin Elmer#：NET-930）清洗缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并在4 ℃下储存。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于3倍信号的膜量：0.5 nM 3 H标记SCH 23390的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 mL包装缓冲液中调节至1 mg/mL，快速冷冻，并在-80% ℃下储存。

分析说明

信号：在竞争结合试验中使用不同量的D 5膜制备液获得的背景和特异性结合值：10 µg/孔信号：背景4. 06特异性结合（cpm）1952规格：1单位= 10 µg（3 H）SCH 23390结合的Bmax：11. 42 pmol/mg蛋白;（3 H）SCH 23390结合的Kd：~ 2. 25 nM

技术规格