Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Human DP Prostanoid Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人DP GPCR膜制备。

产品概述

编码DP的全长人PTGDR cDNA

前列腺素是一系列花生四烯酸代谢产物，在环氧合酶的作用下，通过异构酶和脱氢酶产生，细胞合成后迅速分泌前列腺素，然后与一个由8个GPCR组成的家族结合，发挥其生物学作用（Narumiya和FitzGerald，2001）。前列腺素PGD 2由肥大细胞在被过敏原激活后产生，在支气管哮喘动物模型中，PGD 2与DP和CRTH 2两种受体结合，DP激活G s使cAMP水平升高，DP缺乏导致过敏反应降低（Matsuoka et al.，2000）. Chemicon的DP膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;膜制备物对（3 H）-PGD 2的Kd值为10.39nM，对（3 H）-PGD 2的Kd值为8 nM，5 µg/孔和10 µg/孔DP Membrane Prep通常产生大于4倍的信号背景比。

应用领域

放射性配体结合测定和GTP结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质目标：DP

目标子家族：前列腺素类

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合（检测浓度见图1和图2），孵育1-2小时。过滤前，用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并在4 ℃下储存（Perkin Elmer#：NET-616）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于4倍信号的膜的量：8 nM的3 H-标记的PGD 2的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至0.5mg/ml，快速冷冻，并储存在-80 ℃。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

信号：在竞争结合试验中用不同量的DP膜制备物获得的背景和特异性结合值：10 μ g/孔5 μ g/孔信号：背景4.86 4.12特异性结合（cpm）1345 885表2.在竞争结合试验中用DP膜制备物获得的配体的IC 50值IC 50（nM）前列腺素D 2 12.1 13，14-二氢-15-酮前列腺素D 2 10000 BW A868C4.8规格：1单位= 10 μ g（3 H）PGD2结合的Bmax：5.3 pmol/mg蛋白;（3 H）PGD2结合的Kd：约10.39 nM

技术规格