Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human EP1 Prostanoid Receptor，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人EP 1 GPCR膜制备。

产品概述

编码EP 1的全长人PTGER 1 cDNA

前列腺素类化合物（Prostanoids）是一系列花生四烯酸代谢产物，由环氧合酶、异构酶和合酶作用产生，细胞合成后迅速分泌，并与8个GPCRs结合发挥生物学效应前列腺素PGE 2引起疼痛、血管舒张、T细胞的免疫抑制，4种相关的G蛋白偶联受体EP 1、EP 2、EP 3和EP 4均与PGE 2结合，但各受体的G蛋白偶联状态不同，导致不同的生物学效应;在结肠癌动物模型中，EP 1主要与G q偶联，以动员细胞内钙，并介导PGE 2促进癌前病变形成的作用此外，EP 1对小鼠应激诱导的攻击性和冒险行为具有抑制作用（Matsuoka等人，Millipore的EP 1膜制剂是由我们专有的稳定的重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高的该膜制剂对（3 H）-PGE 2的Kd值为14.5nM。当（3 H）-PGE 2浓度为40 nM时，10 μg/孔的EP 1膜制剂的信号背景比通常大于3倍。

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人EP 1 GPCR膜制备。

放射性配体结合试验和GTP γ S结合

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：EP 1

目标子家族：前列腺素类

产品特点

将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用10 mM MES，pH 6，1 mM EDTA，10 mM MnCl 2洗涤。洗涤3次结合缓冲液：10 mMMES，pH 6，1 mMEDTA，10 mMMnCl 2，过滤并储存在4 ℃放射性配体：（3 H）- PGE 2。（Perkin Elmer # NET-428）清洗缓冲液：10 mM MES，pH 6，1 mM EDTA，10 mM MnCl 2，过滤并储存在4°C下。一个包装包含足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于3倍信号的膜的量：用3 H标记的PGE 2的背景。

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在包装缓冲液中调节至指定浓度，快速冷冻，并在-80 ° C下储存。

制备/使用说明

在-70 ° C下储存。当按照指示储存时，产品自收到之日起至少6个月保持稳定。请勿冷冻和解冻。

分析说明

表1.用EP 1膜制备物10 μg/孔进行竞争结合试验获得的信号：背景和特异性结合值信号：背景4.3特异性结合（cpm）724规格：1单位= 10 μg膜制备物Bmax：4.6 pmol/mg Kd：14.5 nM

技术规格