Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human EP2 Prostanoid Receptor，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人EP 2 GPCR膜制备。

产品概述

编码EP 2的全长人PTGER 2 cDNA

前列腺素类与8个GPCR家族结合以发挥其生物学效应（Narumiya和FitzGerald，2001）。类前列腺素PGE 2引起疼痛、血管舒张、T细胞的免疫抑制、骨吸收和促进癌发生。四种相关的GPCR，EP 1、EP 2、EP 3和EP 4，每一种都与PGE 2结合，但各受体G蛋白偶联状态的不同导致了不同的生物学效应。EP 2主要偶联至Gs以增加细胞内cAMP水平。EP 2受体缺陷的小鼠表现出排卵和受精障碍，盐敏感性高血压（Kennedy等，1999）。已经表明EP 2受体也参与癌症相关的免疫缺陷。因此，EP 2受体的基因敲除减少了肿瘤生长，延长了接受同种移植物注射MC 26或刘易斯肺癌细胞的小鼠的存活时间Millipore的EP 2膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，在本发明中，它们是筛选EP 2激动剂和拮抗剂的理想HTS工具。膜制备物对（3 H）-PGE 2。使用7.5 nM（3 H）-PGE 2，10µg/孔EP 2 Membrane Prep通常产生大于3倍的信号背景比。

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人EP 2 GPCR膜制备。

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，过滤并储存于4 ℃。（Perkin Elmer#：NET-428）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，过滤并储存在4°C。

分析说明

表1.信号：背景和特异性结合值，采用不同量的EP 2受体膜制备液（10 μg/孔）进行竞争结合测定。信号：背景3.60特异性结合（cpm）1146 1单位= 10 μg（3 H）-PGE 2结合的Bmax：4.38 pmol/mg蛋白质（3 H）-PGE 2结合的Kd：~14.52 nM

技术规格