Sigma-Aldrich ChemiScreen Membrane Preparation Recombinant Human ETA Endothelin Receptor, Type A，用于放射性配体结合分析和GTP γ S结合的人ETA GPCR膜制备。

产品概述

编码ETA的全长人EDNRA cDNA

内皮素（Endothelin，ET）是由内皮细胞合成的强缩血管肽，其生物学作用由两个GPCR（GPCR）--ETA和ETB介导，ETA是平滑肌细胞上的主要受体，是体内内皮素缩血管活性的主要介质，内皮素受体也存在于上皮细胞和中枢神经系统中Chemicon的ETA膜制备物是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制备物，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，在本发明中，它们是筛选ETA与其配体相互作用的理想HTS工具，对（125 I）-内皮素-1的Kd值为85 pM。孔ETA Membrane Prep和0.35 nM（125 I）-内皮素-1，分别获得大于7倍和9倍的信号背景比。

生化/生理作用

蛋白质靶标：ETA

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合（检测浓度见图1和2），孵育1-2小时。过滤前，用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟，然后用50 mM HEPES，pH 7.4洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并在4 ℃下储存。（125 I）内皮素-1（Perkin Elmer#：NEX-259）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并在4 ℃下储存。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于5倍信号的膜的量：0.35 nM的125 I标记的内皮素-1的背景

分析说明

Bmax：1.23 pmol/mg Kd：85 pM

技术规格