Sigma-Aldrich ChemiSCREEN GnRH Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人GnRH/LHRH GPCR膜制备。

产品概述

促性腺激素释放激素（GnRH），也称为促黄体生成激素释放激素（LHRH），调节脊椎动物的生殖激素级联反应。从下丘脑释放后，GnRH刺激垂体分泌促黄体生成激素和促卵泡激素。在人类中，I型GnRH受体是一种GPCR，其不常见的是缺乏胞质C-末端尾。尽管一些物种含有II型GnRH受体，这第二种受体的人类版本似乎含有使其失活的突变。促性腺激素释放激素激动剂以低剂量脉冲方式用于治疗不孕症、青春期延迟和隐睾症。促性腺激素释放激素激动剂以高剂量使受体脱敏，并与拮抗剂沿着用于治疗激素依赖性疾病Chemicon的克隆的人I型GnRH受体表达细胞系是在Chem-1宿主中制备的，其支持细胞表面上高水平的重组GnRH受体表达，并含有高水平的混杂G蛋白Galpha 15以将受体偶联到钙信号传导途径。该细胞系是筛选GnRH受体激动剂和拮抗剂的理想工具。

人I型GnRH受体

应用领域

放射性配体结合测定和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：GnRH / LHRH

目标亚家族：GnRH

产品特点

Inucbation Conditions
Membranes are mixed with radioactive ligand and unlabeled competitor (see Figures 1 and 2 for concentrations tested) in binding buffer in a nonbinding 96-well plate, and incubated for 1-2 h. Prior to filtration, a GF/C 96-well filter plate is coated with 0.33% polyethyleneimine for 30 min, then washed with 50 mM HEPES, pH 7.4, 0.5% BSA. Binding reaction is transferred to the filter plate, and washed 3 times (1 mL per well per wash) with Wash Buffer. The plate is dried and counted.

Binding buffer: 50 mM Hepes, pH 7.4, 5 mM MgCl2, 1 mM CaCl2, 0.2% BSA, filtered and stored at 4°C

Radioligand: [125I]-[D-Trp6]-LHRH (Perkin Elmer # NEX365)

Wash Buffer: 50 mM Hepes, pH 7.4, 500 mM NaCl , 0.1% BSA, filtered and stored at 4°C.

One vial contains enough membranes for at least 200 assays (units), where an unit is the amount of membrane that will yield greater than 3-fold signal:background with 125I-labeled [D-Trp6]-LHRH at 0.5nM.

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 mL包装缓冲液中调节至2.0mg/ml，快速冷冻，并在-80 ℃下储存。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

质量标准：Bmax：1.0 pmol/mg Kd：0.3 nM

技术规格