Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human LPA1 Lysophospholipid Receptor，用于GTP γ S结合试验的人LPA1/EDG2 GPCR膜制备。

产品概述

编码LPA 1的人EDG 2

溶血磷脂酸（Lysophosphatidic acid，LPA）是活化血小板产生的一种溶血磷脂，具有抑制腺苷酸环化酶、促进DNA合成、改变细胞形态、增加细胞内钙离子浓度等作用，其生物学效应由LPA 1、LPA 2和LPA 3三个GPCRs家族介导LPA 1广泛表达，尤其是在胚胎大脑皮层的脑室区表达显著，缺乏LPA 1的小鼠表现出颅面异常和大脑皮层发育缺陷（哈里森等人，2003年; Choi等人，2008）。LPA 1还促进对组织损伤的纤维化反应（Tager等人，2008年）Millipore的LPA 1膜制剂是一种由专有稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，该细胞系也用于Millipore的LPA 1钙优化细胞系（HTS 089 C）在GTPγ S结合试验中，该LPA 1膜制剂显示出组成型和激动剂诱导的活性，因此它是筛选激动剂、反向激动剂和拮抗剂活性化合物的理想HTS工具。

应用领域

GTPγS结合试验

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白靶标：LPA 1/EDG 2

靶亚家族：溶血磷脂

产品特点

诱导条件GTPγS测定条件：通过加入等质量浓度的皂苷使膜透化，然后与（35 S）-GTPγS混合（终浓度为0.3nM）在20 mM HEPES中，pH7.4/100 mM NaCl/10 mM MgCl 2 /10 μM GDP，加入未标记配体至图1所示终浓度将结合反应转移到预先用水润湿的FB滤板（Millipore MAHF B1 H）中。用冷的10 mM磷酸钠（pH 7.4）洗涤板3次（每次洗涤每孔1 mL），然后干燥并计数。

物理形态

One package contains enough membranes for at least 200 assays (units), where one unit is the amount of membrane that will yield greater than 1000 cpm specific LPA-stimulated [35S]-GTPγS binding.
Liquid in packaging buffer: 50 mM Tris pH 7.4, 10% glycerol and 1% BSA with no preservatives.
Packaging method: Membrane protein was adjusted to the indicated concentration in packaging buffer, rapidly frozen, and stored at -80°C.

制备/使用说明

在-70 ° C下储存。当按照指示储存时，产品自收到之日起至少6个月保持稳定。请勿冷冻和解冻。

分析说明

在LPA法GTPγS结合试验中，1单位= 5 μg EC 50：~ 73 nM

技术规格