Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human NOP Opioid Receptor，用于放射性配体结合分析和GTP γ S结合的人NOP/ORL 1/OP 4 GPCR膜制备。

产品概述

编码NOP的全长人OPRL 1 cDNA

NOP受体NOP的内源性配体已被表征并被称为阿片肽FQ或伤害感受素（OFQ/N），其进而不与阿片受体家族的其他成员结合。NOP在CNS中广泛表达，并且OFQ/N与NOP 1的结合似乎在伤害感受中起作用，自发活动、焦虑、奖赏、记忆和对经典阿片类药物的耐受性Millipore的NOP膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，本发明提供了一种方法，它们是筛选NOP激动剂和拮抗剂的理想HTS工具，膜制备物对（125 II）-用0.1 nM（125 I）-Nociceptin，5μg/孔NOP Membrane Prep通常产生大于10倍的信号背景比。

应用领域

放射性配体结合试验和GTP γ S结合

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶点：NOP /ORL 1/OP 4

目标子家族：阿片类

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM Tris-HCl，pH 7.4洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mM Tris-HCl，pH7.4，过滤并在4 ℃下储存放射性配体：（125 I）-Nociceptin。（Perkin Elmer#：NEX-324）清洗缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜的量：125 I标记的痛敏肽的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：50 mM Tris pH 7.4、10%甘油和1% BSA，不含防腐剂。包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至指定浓度，快速冷冻，并在-80 ° C下储存

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存至产品标签上注明的有效期。请勿冷冻和解冻。

分析说明

表1.信号：在使用NOP受体膜制备物的竞争结合测定中获得的背景和特异性结合值。5 μg/孔信号：背景23.8特异性结合（cpm）6656规格：1单位= 5 μg（125 I）-Nociceptin结合的Bmax：1.1 pmol/mg蛋白质（125 I）-Nociceptin结合的Kd：~0.06 nM

技术规格