Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Human PK1 Prokineticin Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人PK1/PKR1 GPCR膜制备。

产品概述

全长人GPR 73 cDNA，编码PK 1

前动力素，也称为内分泌腺血管内皮生长因子（EG-VEGF），是两种约10 kD的分泌蛋白，最初被描述为介导血管生成和胃肠道平滑肌收缩（Li等人，2001年;随后，发现前动力素介导中枢神经系统功能，包括昼夜节律和嗅球发育（Cheng等，2002; Ng等，2005）.两种Gq偶联受体，PK 1和PK 2 GPR 73（也称为GPR 73 a和GPR 73 b）介导对前动力素的细胞应答Chemicon的PK 1膜制备物是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制备物，以确保高水平的GPCR表面表达;膜制备物对（125 I）-Mamba Intestinal Toxin-1（MIT-1）的Kd值为0.11 nM，当（125 I）-MIT-1浓度为0.2 nM时，2.5 μg/孔和5 μg/孔的PK 1 Membrane Prep的信号背景比通常大于5倍。

应用领域

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶点：PK 1/PKR 1

靶向亚家族：原动力素

产品特点

将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，0.5%BSA，将结合反应物转移至滤板上，洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并在4 ℃下储存。（125 I）-MIT-1（Perkin Elmer#：NEX-410）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜的量：0.2 nM的125 I标记的MIT-1的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：50 mM Tris pH 7.4，10%甘油和1% BSA，无防腐剂。包装方法：将膜蛋白用1 mL包装缓冲液调节至0.5 mg/ml，迅速冷冻，-80 ° C保存。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

信号：在竞争结合测定中用不同量的PK 1膜制备物获得的背景和特异性结合值：5 μg/孔2.5 μg/孔信号：背景6 6.4特异性结合（cpm）3166 1798规格：1单位= 5 μg（125 I）MIT-1结合的Bmax：0.58 pmol/mg蛋白;（125 I）MIT-1结合的Kd：~ 0.11 nM

技术规格