Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human S1P1 Lysophospholipid Receptor，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人S1 P1/EDG 1 GPCR膜制备。

产品概述

编码S1 P 1的全长人EDG 1 cDNA

1-磷酸鞘氨醇（Sphingosine 1-phosphate，S1 P）是一种具有生物活性的溶血磷脂，通过一个由5个G蛋白偶联受体组成的家族传递信号，调节细胞增殖、迁移、细胞骨架组织和分化。S1 P 1是第一个被鉴定的S1 P受体。它主要与PTX敏感的Gi/o蛋白偶联，介导S1 P诱导的腺苷酸环化酶抑制。S1 P 1的表达广泛，包括脾、脑、心脏、肺、脂肪组织、肝、胸腺、肾和骨骼肌（Zhang et al.1999）。小鼠中S1 P1的缺失导致胚胎致死（Liu et al.，2000），死亡可归因于不完全的血管成熟。（Matloubian等，2004）. Millipore的S1 P 1膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，在本发明中，它们是筛选S1 P1与其配体相互作用的理想HTS工具。该细胞系对鞘氨醇1-在GTPγS结合试验中，膜制备物对鞘氨醇1-磷酸的EC 50为9.5 μM。

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人S1 P1/EDG 1 GPCR膜制备。

放射性配体结合试验和GTP γ S结合

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶点：S1 P1/EDG 1

靶亚家族：溶血磷脂

产品特点

通过加入等质量浓度的皂苷使膜透化，然后与（35 S）-GTPγS混合（终浓度为0.3 nM），pH7.4/100 mM NaCl/10 mM MgCl 2 /10 μM GDP，加入未标记的鞘氨醇1-磷酸至图1所示终浓度将结合反应转移至GF/B滤板上，（Millipore MAHF B1 H），预先用水预润湿。用冷的10 mM磷酸钠（pH 7.4）洗涤（每次洗涤1 mL/孔），然后干燥并计数。以较低的GDP浓度进行反应（0.5 μM）导致组成型活性升高（图2）。一个小瓶含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于1000 cpm的特定丙酸钠刺激（35 S）的膜的量。GTPγS结合：预期S1 P1膜制备物在放射性配体结合试验中具有功能性;然而，最终用户需要确定与本产品一起使用的最佳放射性标记配体。

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在包装缓冲液中调节至1 mg/ml，快速冷冻，并在-80 ℃下储存。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

1单位= 5 μg 1-磷酸鞘氨醇GTPγS结合试验中的EC 50：~ 9.5 nM

技术规格