Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Human Recombinant S1P2 Lysophospholipid Receptor Membrane Preparation，用于GTPγS结合和放射性配体结合试验的人S1 P2/EDG 5 GPCR膜制备。

产品概述

鞘氨醇1-磷酸（S1 P）是一种生物活性脂质，可结合并激活GPCR家族S1 P1 -5 S1 P及其受体之间的相互作用介导细胞骨架重排和细胞迁移，在血管生成、淋巴细胞运输和平滑肌发育中具有功能性后果（Anliker和Chun，2004）。S1 P 1（Edg-1）仅通过Gi发出信号，而S1 P 2（Edg-5）和S1 P 3（Edg-3）激活Gi、Gq和G12/13。虽然S1 P 1和S1 P 3促进细胞迁移，但S1 P 2抑制几种细胞类型中的细胞迁移;这些相反的功能似乎是由每种受体激活Gi的能力差异引起的（Arikawa等人，2003; Sugimoto等人，2003; Goparaju等，2005）。对基因敲除小鼠的研究表明，S1 P 2和S1 P 3在胚胎发育期间维持血管完整性方面具有冗余功能Chemicon的S1 P 2膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;在GTPγS结合试验中，该细胞系对S1 P的EC_（50）为7.2nM。

人EDG-5cDNA编码S1 P 2

应用领域

GTPγS结合和放射性配体结合试验。

用于GTPγS结合和放射性配体结合试验的人S1 P2/EDG 5 GPCR膜制备。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶点：S1 P2/EDG 5

靶亚家族：溶血磷脂

产品特点

通过加入等质量浓度的皂苷使膜透化，然后与（35 S）-GTPγS混合（终浓度为0.1 nM）在20 mM HEPES，pH 7.4/100 mM NaCl/10 mM MgCl 2 /0.5 μM GDP中的溶液中，加入未标记的S1 P至图1所示的终浓度将结合反应转移至GF/B滤板上，（Millipore MAHF B1 H），预先用水预润湿，并洗涤3次（每孔每次洗涤1 mL），用冷的10 mM磷酸钠，pH7.4。将平板干燥并计数。一个小瓶含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于1000 cpm的特异性S1 P刺激的（35 S）的膜的量。GTPγS结合：预期S1 P 2膜制备物在放射性配体结合试验中具有功能性;然而，最终用户需要确定与本产品一起使用的最佳放射性标记配体。

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在包装缓冲液中调节至1 mg/ml，快速冷冻，并储存在-80 ℃。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

GTPγS结合试验（S1 P法）中的EC 50：~ 7.2 nM

技术规格