



| 货号 | 包装规格 | 操作 |
|---|---|---|
| HTS079M | 200 units |
人VPAC 2
血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)是一种由28个氨基酸组成的具有血管舒张活性的多肽,通过与VPAC 1和VPAC 2两种B类GPCR结合,在中枢神经系统、血管系统、免疫系统和肾上腺髓质发挥作用(Harmar等,1998)。在免疫系统中,VPAC 2在刺激的CD4 T细胞上表达,T细胞来源的VIP与VPAC 2的结合诱导了向Th2途径的转变(Delgado等人,2004年;此外,VPAC 2是下丘脑视交叉上核的昼夜节律起搏器的重要调节剂Chemicon的VPAC 2膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂,以确保高水平的GPCR表面表达;因此,本发明提供了一种方法,它们是筛选VPAC 2与PACAP相互作用拮抗剂的理想HTS工具。使用5 μ g/孔VPAC 2 Membrane Prep和0.5 nM(125 I)-PACAP 27,获得大于15倍的信号背景比。
放射性配体结合测定和GTPγS结合。
蛋白质靶点:VPAC 2/VIP 2
孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合(检测浓度见图1和图2),孵育1-2小时。过滤前,用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟,然后用50 mM HEPES(pH 7.4)洗涤,0.5%BSA,将结合反应物转移至滤板上,洗涤3次结合缓冲液:50 mM Hepes,pH 7.4,5 mM MgCl 2,1 mM CaCl 2,0.2%BSA,过滤并在4 ℃下储存。(125 I)PACAP 27(Perkin Elmer#NEX294)洗涤缓冲液:50 mM Hepes,pH 7.4,500 mM NaCl,0.1%BSA,过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定(单位)的膜,其中单位是将产生大于15倍信号的膜的量:125 I标记的PACAP 27(0.5 nM)背景。
包装缓冲液中的液体:包装方法:将膜蛋白在包装缓冲液中调节至指定浓度,快速冷冻,并在-80 ° C下储存。
信号:使用5 μ g/孔VPAC 2膜制备物在竞争性结合试验中获得的背景和特异性结合值:10 μg/孔5 μg/孔信号:背景25.5. 22.8特异性结合(cpm)32913 27650规格:1单位= 5 μg膜制备物Bmax:17.3 pmol/mg Kd:0.9 nM
| 英文名称 | ChemiSCREEN Human VPAC2 VIP Receptor Membrane Preparation |
| UNSPSC | 41106514 |
| NACRES | NA.84 |
| ECL@SS | 32161000 |
| 生物来源 | 人类 |
| 重组 | 在Chem-1细胞中表达 |
| 制造商/商标 | ChemiScreen; Chemicon® |
| 技术 | 配体结合试验:适用(GTPγS);放射性配体结合试验(RLBA):适用 |
| NCBI 登录号 | NM_003382.3 |
| UniProt 登录号 | P41587 |
| 运输状态 | 干冰 |
| 储存温度 | -65 至 -96°C |
| 质量等级 | 100 |
| 包装规格(货号 HTS079M) | 200 units |