Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Human Y 2 Neuropeptide Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人Y2 GPCR膜制备。

产品概述

编码Y 2的全长人NPY 2 R cDNA

NPY家族由神经肽Y（NPY）、肽YY（PYY）和胰多肽（PP）3个36个氨基酸组成，它们与NPY受体家族的G蛋白偶联受体结合，在分子水平上已确定了5种NPY受体：Y1、Y2、Y 4、Y 5和Y 6，NPY家族肽与NPY受体的结合介导多种生理效应，包括促进食物摄取、减少焦虑、抑制神经递质和激素释放、血管收缩、和肠道运动。Y2主要在中枢神经系统表达，并介导神经递质释放的突触前抑制（Michel等，1998）. Chemicon的Y2膜制剂是从我们专有的稳定重组细胞系制备的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;该膜对125 I-人PYY的Kd值为1.28nM，对0.5nM的125 I-人PYY，5或10µg/孔Y 2膜制备液产生的信号背景比大于10倍。

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTPγS结合的人Y2 GPCR膜制备。

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：Y2

靶标亚家族：神经肽Y

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合（检测浓度见图1和图2），孵育1-2小时。过滤前，用0.33%聚乙烯亚胺包被GF/C 96孔滤板30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，0.5%BSA，将结合反应物转移至滤板上，洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并储存于4°C放射性配体：（125 I）-人PYY（Perkin Elmer#：NEX-341）清洗缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4°C下。一个包装包含足够至少200次检测（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜量：0.5 nM 125 I标记人PYY的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：50 mM Tris pH 7.4，10%甘油和1% BSA，无防腐剂。包装方法：将膜蛋白用1 mL包装缓冲液调节至0.5 mg/ml，迅速冷冻，-80 ° C保存。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

信号：在竞争结合试验中使用不同量的TP膜制备物获得的背景和特异性结合值：10 µ g/孔5 µ g/孔信号：背景19.8 26.3特异性结合（cpm）27347 23335规格：1单位= 5 µ g（125 I）人PYY结合的Bmax：17.89 pmol/mg蛋白;（125 I）人PYY结合的Kd：~1.28 nM

技术规格