Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human α1B Adrenergic Receptor，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人α 1B GPCR膜制备。

产品概述

编码α 1B肾上腺素能受体的全长人ADRA 1B cDNA

内源性儿茶酚胺肾上腺素和去甲肾上腺素对平滑肌活动、心脏功能、糖和脂肪代谢、激素分泌、神经递质释放和中枢神经系统活动具有重要影响，这些活动由α和β肾上腺素受体两个亚家族的GPCR介导（Bylund等，1994）。肾上腺素受体α1亚类的三个成员α 1 A、α 1 B和α 1 D与Gq偶联，并促进血管和尿道平滑肌的收缩、肠平滑肌的松弛、心脏收缩力的增加，不同的亚型有重叠的分布，并且依赖于物种和组织，α 1B突变体在转基因小鼠心脏中的组成性活性过表达导致心脏肥大，心脏重量增加，对α 1B基因敲除小鼠的分析提供了证据，证明α 1B是α 1激动剂诱导的血压和主动脉收缩反应的介导剂（Milano等，1994）。在缺乏α 1B -肾上腺素能受体的小鼠中，pysochostimulant和阿片类药物的运动和奖励作用受到抑制（Drouin等，2002）。Millipore的α 1B膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;膜制备物对（3 H）-哌唑嗪的Kd值为0.8nM，当（3 H）-哌唑嗪浓度为1 nM时，5μg/孔的α 1B膜制备物的信号背景比大于5倍。

应用领域

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：alpha 1B

目标子家族：肾上腺素能

产品特点

激发条件推荐的试验条件：将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mMTris，pH7.4洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mMTris，pH7.4，10 mMMgCl 2，1 mMEDTA，过滤并储存在4 ℃放射性配体：（3 H）-哌唑嗪。（Perkin Elmer #NET 823）洗涤缓冲液：50 mM Tris，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃下。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于5倍信号的膜的量：1 nM 3 H标记的哌唑嗪的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至1 mg/ml，快速冷冻，并在-80 ℃下储存

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

表1.信号：不同量的α 1 B受体膜制备物（5 μg/孔）竞争结合试验中获得的背景和特异性结合值信号：背景11.8特异性结合（cpm）1171规格：1单位= 5 μg膜制备物B（3 H）-哌唑嗪结合的最大值：12.9 pmol/mg蛋白质（3 H）-哌唑嗪结合的Kd：~0.8 nM

技术规格