Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human β1 Adrenoceptor Receptor，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人β 1 GPCR膜制备。

产品概述

编码β 1肾上腺素受体的全长人ADRB 1 cDNA

内源性儿茶酚胺肾上腺素和去甲肾上腺素对平滑肌活动、心功能、碳水化合物和脂肪代谢、激素分泌、神经递质释放和中枢神经系统的活动有着深远的影响，这些活动由α和β肾上腺素能受体两个亚家族的GPCRs介导（Bylund等，1994）。β-肾上腺素能受体家族的三个成员β 1、β 2和β 3与G结合，在激活时增加cAMP。在心脏，β 1受体占β-肾上腺素能受体的70-80%。心脏β-肾上腺素能受体的激活急性增加心率、心输出量和心脏自律性，并慢性增加心肌细胞凋亡。在衰竭的心脏中，β 1亚型下调和脱敏，可能是儿茶酚胺水平升高的结果，因此β-肾上腺素能受体拮抗剂β受体阻滞剂可有效治疗充血性心力衰竭和心律失常Millipore的β 1肾上腺素受体膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制备的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，它们是筛选β 1肾上腺素能受体相互作用拮抗剂的理想HTS工具。膜制备物对（125 I）-（-）碘氰基吲哚酚（ICYP）的Kd为2.6 nM。使用5 µg/孔β 1肾上腺素能受体膜制备物和0.25 nM（125 I）-（-）ICYP，可获得大于15倍的信号-背景比。

应用领域

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：β 1

目标子家族：肾上腺素能

产品特点

孵育条件将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES，pH 7.4洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，过滤并在4 ℃下储存放射性配体：（125 I）-（-）碘氰基吲哚酚（Perkin Elmer#NEX189）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，过滤并储存在4°C。

物理形态

一个包装包含足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中一个单位是将产生大于15倍信号的膜的量：0.25 nM的125 I标记的（-）碘氰基吲哚酚的背景。包装缓冲液中的液体：50 mM Tris pH 7.4，10%甘油和1% BSA，不含防腐剂。将膜蛋白在包装缓冲液中调节至指定浓度，快速冷冻，并储存在-80 ° C下。

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

5 μ g/孔10 μ g/孔信号：背景28.5 34.6特异性结合（cpm）27002 28467质量标准：1单位= 5 μ g膜制备液Bmax：47.9 pmol/mg Kd：~2.6 nM

技术规格