Sigma-Aldrich ChemiScreen Recombinant Human Glucagon Receptor Membrane Preparation，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人胰高血糖素/GCG GPCR膜制备。

产品概述

转移：编码胰高血糖素受体的全长人GCGR cDNA宿主细胞：Chem-1，一种无内源性胰高血糖素受体表达的贴壁哺乳动物细胞系。

胰高血糖素是一种由29个氨基酸组成的肽，它能刺激肝脏中的糖原分解和糖原异生，从而增加血糖。（或B类）GPCR，通过G s发出信号刺激cAMP产生（马约等人，2003）。缺乏胰高血糖素受体的小鼠在禁食后具有轻度低血糖，并表现出胰腺α细胞的增生（Gelling et al.，2003）。由于胰高血糖素受体在促进高血糖中的作用，它是治疗糖尿病的潜在靶点。Chemicon的胰高血糖素受体膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，它们是筛选胰高血糖素受体相互作用拮抗剂及其配体的理想HTS工具。膜制备物对（125 I）-胰高血糖素显示出3.09 nM的Kd。对于1 nM（125 I）-胰高血糖素，5或10 μ g/孔胰高血糖素受体Membrane Prep产生大于10倍的信号背景比。

产品特点

激发条件推荐的试验条件：在非结合96孔板中，将膜与结合缓冲液中的放射性配体和未标记的竞争剂混合，并孵育1-2小时。在过滤之前，将GF/C 96孔滤板用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES（pH 7.4）洗涤，将结合反应转移至滤板，并洗涤3次将板干燥并计数。·结合缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并储存在4 ℃（Perkin Elmer#：NEX-207）50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜的量：1 nM（125 I）标记胰高血糖素的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1ml包装缓冲液中调节至0.5mg/ml，快速冷冻，并储存在-80 ℃。

分析说明

规格说明：1单位= 5 μg B max（125 I）胰高血糖素结合：16.7 pmol/mg蛋白质（125 I）胰高血糖素结合的Kd：~ 3.09 nM信号：在竞争结合测定中使用不同量的胰高血糖素受体膜制备物获得的背景和特异性结合值：10 µg/孔5 µg/孔信号：背景10.1 35特异性结合（cpm）33315 36252

技术规格