Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human sst2 Somatostatin Receptor，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人sst 2 GPCR膜制备。

产品概述

编码sst 2的全长人SSTR 2 cDNA

生长抑素（sst）是一种多功能肽，具有两种生物活性形式，sst-14和sst-28，它们在整个大脑以及周围组织如胰腺和肠道的神经元中合成（吉利斯，1997）. SST发挥多种作用，包括抑制内分泌，调节神经传递，生长抑素受体sst 2mRNA主要在中枢神经系统表达。使用sst 2基因敲除小鼠的研究发现，相关行为，而运动和探索活动减少，在应激诱导的情况下（再加上垂体ACTH释放增加，这是一种应激反应的调节剂）在外周，小鼠胰岛中sst对胰高血糖素释放的抑制主要通过sst 2介导（Strowski等，2000）。此外，内源性sst通过sst 2起作用，通过抑制胃泌素活性来抑制胃酸分泌（Martinez等，1998）. Millipore的sst 2膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，在本发明中，它们是筛选sst 2激动剂和拮抗剂的理想HTS工具。膜制备物对（125 I）-生长抑素14。使用0.75 nM（125 I）-生长抑素14，5 μ g/孔sst 2 Membrane Prep通常产生大于20倍的信号背景比。

应用领域

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：sst2

靶向亚家族：生长抑素

产品特点

激发条件推荐的试验条件：将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES，pH 7.4，0.5%BSA洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并在4 ℃下保存放射性配体：（125 I）-生长抑素14。（Perkin Elmer NEX-389）清洗缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4°C下。一个包装包含足够用于至少200次测定的膜（单位），其中一个单位是将产生大于20倍信号的膜量：0.75 nM 125 I标记的生长激素抑制素14的背景

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至1 mg/ml，快速冷冻，并在-80 ℃下储存

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

表1.信号：在竞争结合测定中获得的不同量的sst 2受体膜制备物的背景和特异性结合值。10 μg/孔5 μg/孔信号：背景16.2 36.2特异性结合（cpm）58438 54632规格：1单位= 5 μg（125 I）-生长抑素结合的Bmax：18.9 pmol/mg蛋白质（125 I）-生长抑素结合的Kd：~0.95 nM

技术规格