Sigma-Aldrich ChemiSCREEN Membrane Preparation Recombinant Human sst5 Somatostatin Receptor，用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人sst 5 GPCR膜制备。

产品概述

编码sst 5的全长人SSTR 5 cDNA

生长抑素（sst）是一种多功能肽，具有两种生物活性形式，sst-14和sst-28，它们在整个大脑以及周围组织如胰腺和肠道的神经元中合成（吉利斯，1997）. SST发挥多种作用，包括抑制内分泌，调节神经传递，以及通过刺激一个由五种G蛋白偶联受体组成的家族来调节细胞增殖。生长抑素受体sst 5是一种抑制性G蛋白偶联受体，对各种细胞类型产生强烈的细胞生长抑制作用。在小鼠中，SST 5介导生长抑素对胰腺胰岛素分泌的抑制，并有助于调节葡萄糖稳态和胰岛素敏感性（Strowski等人，2003年）。此外，SST 5缺乏导致脑和胰腺生长抑素表达的亚型选择性性二态性变化Millipore的sst 5膜制剂是由我们专有的稳定重组细胞系制成的粗膜制剂，以确保高水平的GPCR表面表达;因此，在本发明中，它们是筛选sst 5激动剂和拮抗剂的理想HTS工具。膜制备物对（125 I）-生长抑素14。使用0.5 nM（125 I）-生长抑素14，5 μg/孔sst 5 Membrane Prep通常产生大于10倍的信号背景比。

应用领域

用于放射性配体结合试验和GTP γ S结合的人sst 5 GPCR膜制备。

放射性配体结合试验和GTP γ S结合。

生化/生理作用

GPCR Class：A

蛋白质靶标：sst5

靶向亚家族：生长抑素

产品特点

激发条件推荐的试验条件：将膜与放射性配体和未标记的竞争剂混合过滤前，将FC 96孔收获板置于非结合96孔板中的结合缓冲液中（测试的浓度参见图1和2），并孵育1-2小时。（Millipore目录号MAHF C1 H）用0.33%聚乙烯亚胺包被30分钟，然后用50 mM HEPES，pH 7.4，0.5%BSA洗涤。洗涤3次结合缓冲液：50 mM Hepes，pH7.4，5 mM MgCl 2，1 mM CaCl 2，0.2% BSA，过滤并在4 ℃下保存放射性配体：（125 I）-生长抑素14。（Perkin Elmer#：NEX-389）洗涤缓冲液：50 mM Hepes，pH 7.4，500 mM NaCl，0.1% BSA，过滤并储存在4 ℃。一个包装含有足够用于至少200次测定（单位）的膜，其中单位是将产生大于10倍信号的膜的量：用0.5 nM的125 I标记的生长抑素14作为背景。

物理形态

包装缓冲液中的液体：包装方法：将膜蛋白在1 ml包装缓冲液中调节至1 mg/ml，快速冷冻，并在-80 ℃下储存

制备/使用说明

在-70 ° C下冷冻保存长达2年。不要冷冻和解冻。

分析说明

表1.信号：在竞争结合试验中用不同量的sst 5受体膜制备物获得的背景和特异性结合值。10 μg/孔5 μg/孔信号：背景15.2 15.7特异性结合（cpm）25710 21425规格：1单位= 5 μg膜制备物B（125 I）-生长抑素结合的最大值：10.4 pmol/mg蛋白质（125 I）-生长抑素结合的Kd：~1.2 nM

技术规格