Sigma-Aldrich 脱氧核糖核酸酶 I 牛，重组体，在毕赤酵母中表达，冻干粉末，RNA酶和蛋白酶，游离

产品概述

重组体，在毕赤酵母中表达，冻干粉末，RNA酶和蛋白酶，游离

应用领域

脱氧核糖核酸酶 I 牛已用于制备冷细胞裂解缓冲液， 完全 RNA 裂解缓冲液， 细胞裂解缓冲液，用于检测重组标签蛋白的表达。

Sigma 酶已用于消化从 龙舌兰属 克隆中提取的 DNA。在一项研究中使用了该酶，该研究调查了表观遗传变化对 KNOTTED1 样同源盒 (KNOX) 转录因子调控表达的影响。PMID 23126409

用于从蛋白质样品中除去 DNA。

脱氧核糖核酸酶 I 牛已被用于研究大鼠肝脏提取物对 DNA 聚合酶的抑制作用。脱氧核糖核酸酶 I 牛也用于研究离子强度对酶活性的影响。

生化/生理作用

DNaseⅠ 是一种核酸内切酶，作用于嘧啶附近的磷酸二酯键，产生末端为 5′ 的多核苷酸-磷酸盐。最适 pH 值介于 7 和 8 之间。二价阳离子如 Mn²⁺, Ca²⁺, Co²⁺和 Zn²⁺ 的浓度可稳定酶抵抗蛋白水解消化。浓度为5mM的 Ca ²⁺可稳定酶对蛋白水解的消化作用。PMID 5769189已知 2-巯基乙醇、螯合剂、十二烷基硫酸钠 (SDS) PMID 1168640 和肌动蛋白 PMID 4140510 可抑制酶活性。

将单链和双链 DNA 消化至携带 5' 的单链和寡核苷酸混合物中磷酸盐和 3′ OH终点。这种催化活性是二价离子依赖性的。在 M ²⁺ 存在下，DNaseⅠ 随机独立地水解双链 DNA 各链。在 Mn²⁺ 存在下，两条链均可裂解。

产品特点

通过去除 DNA 进行 RNA 纯化准备 DNA 进行缺口平移 ¹足迹法分析确定 DNA-蛋白质相互作用 ²

物理形态

以冻干粉形式提供，含甘氨酸作为稳定剂

制备/使用说明

不使用任何动物细胞或动物源性材料生产。

酶粉末可在 pH 4.0-9.0 的水中或任何缓冲液中复溶，但磷酸盐缓冲液除外。应避免使用钙螯合剂。当 DNAse I 溶于 0.15 MNaCl 的 10 mg/mL 溶液，在 –20°C 条件下储存一周时，活性损失可能 <10%。相同的溶液在 2-8°C 条件下储存时，活性损失可能约为 20%。在 60°C 条件下可保持活性长达 5 小时，在 68°C 条件下可在 <10 min 内失去活性。在 1 mg/mL 浓度的醋酸盐缓冲液 (pH 5.0) 和 tris 缓冲液 (pH 7.2) 中以 6%/小时的速率失去活性。

其他说明

采用 pH 5.0 和 25°C 下的小牛胸腺 DNA，一个单位将产生 ΔA ₂₆₀ ，0.001/min/mL 反应混合物

技术规格